PCS-i220A/B柱后衍生仪在15药典测定中应用

测量方法：

本法系用液相色谱法(通则0512)测定药材、饮片及制剂中的毒素(以毒素B1、毒素B2、毒素G1，毒素G2总量计)，除另有规定外，按下列方法测定。

液相色谱仪器构成：
等度液相色谱仪（高压输液泵一台、荧光检测器一台、柱温箱一台、进样器1件、色谱柱一根等）
柱后衍生仪：PCS-i220A/B

色谱柱：PC C18 4.6×150mm，5μm
高速离心机：离心速度4000转／分钟以上
溶剂过滤器
超声波清洗器
固相萃取仪
免疫亲和柱
分析天平：万分之一
均质器（高速搅拌器）：搅拌速度大于11000转／分钟

试剂
甲醇：色谱纯
乙腈：色谱纯
0.05%的碘溶液
超纯水
毒素B1.毒素B2、毒素G1、毒素G2对照品

色谱条件
检测器：荧光检测器
色谱柱：PC C18 4.6×150mm，5μm
流动相：甲醇-乙腈-水(40∶18∶42)
流速：1.0ml/min
柱温：40℃
衍生溶液：0.05％的碘溶液(取碘0.5g，加入甲醇100ml使溶解，用水稀释至1000ml制成)
衍生化泵流速：0.2ml/min
衍生化温度:70℃
激发波长λex=360nm(或365nm)，发射波长λem=450nm

混合对照品溶液的制备
精密量取毒素混合标准品(毒素B1、毒素B2、毒素G1、毒素G2标示浓度分别为1.0μg／ml、0.3μg／ml、1.0μg／ml、0.3μg／m1)0.5ml，置10ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，作为储备液。精密量取储备液1ml，置25ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，即得。 

供试品溶液的制备
取供试品粉末约15g(过二号筛)，精密称定，加入氯化钠3g，置于均质瓶中，精密加入70％甲醇溶液75ml，高速搅拌2分钟(搅拌速度大于11000转／分钟)，离心5分钟(离心速度4000转／分钟)，精密量取上清液15ml，置50ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，量取续滤液20.0ml，通过免疫亲合柱，流速每分钟3ml，用水20ml洗脱，洗脱液弃去，使空气进入柱子，将水挤出柱子，再用适量甲醇洗脱，收集洗脱液，置2ml量瓶中，并用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。 

测定方法
精密吸取上述混合对照品溶液20μl，注入液相色谱仪，测定峰面积。另精密吸取上述供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，测定峰面积，计算出zui终结果。
毒素B1、B2、G1、G2对照品色谱图：

以上是使用PCS-i220A/B柱后衍生仪 结果基线平稳 峰型窄 检出限低 检测准确 *方法要求。